QCM QCM Quiz TP biochimie - Partie 2 par Boubou201 Boubou201 19 joués - il y a 2 ans QCM 10 QUESTIONS expert QCM : Chaque question peut avoir plusieurs bonnes réponses 1 Si la purification du lysozyme (pI=11), sur une colonne échangeuse de cations, se déroule à pH = 7.. (sélectionne les solutions vraies) La résine de la colonne sera chargée négativementLe lysozyme sera électriquement neutre et ne se liera pas à la résineLe lysozyme se fixera à la résine mais il ne sera pas élué par du NaClLa résine liera le lysozyme, mais liera également de nombreuses autres protéinesLe rendement d'extraction sera moins bon que si l'on travaille à pH 10 2 Lors de la purification d'une protéine de point isoélectrique de 5 (pI=5) sur une colonne échangeuse d'anions... La résine de la colonne doit être chargée négativementOn doit travailler à un pH < 5L'élution sera réalisée par du NaCl grâce au CL -Le FT contiendra, entre autre, du lysozyme (pI=11)Les protéines chargées négativement au pH expérimental se lieront à la colonne 3 Différentes fractions, obtenues lors de la purification du lysozyme, sont mélangées à une concentration définie de substrat (S)= constante. Observez les valeurs d'absorbance lues à 430nm au cours du temps pour chaque fraction, et répondez aux propositions suivantes : Erreur de manipulation de E2Toutes les fractions contiennent du lysozymesE1 est la plus concentrée en lysozymesLa vitesse réactionnelle initiale est la plus élevée pour E 1Le filtrat contient 800 unités arbitraires de lysozymes Quizz.biz est un service gratuit financé par la publicité. Pour nous aider et ne plus voir ce message : Je désactive Adblock ou Je vous soutiens sur Tipeee 4 Une solution de protéines (X) est mélangée à des solutions de bactéries de concentrations croissantes (0,1 à 0,4 mg/mL). Observez les valeurs d’absorbance lues à 430nm au cours du temps et répondez aux propositions suivantes : L’absorbance décroit au cours du temps car les protéines de la solution X se dégradent.Il y a du lysozyme dans la solution X.La vitesse réactionnelle initiale dépend de la quantité de bactéries en solutionLa vitesse maximale est atteinte dès 0,3 mg/mL de bactéries.Après environ 20 secondes, la réaction ralentit à cause de l’appauvrissement en substrat. 5 Le paramètre cinétique Km du lysozyme... A la même valeur que le Km des autres enzymes, c’est une constante.Varie en fonction des conditions expérimentales.Est déterminé à partir des mesures de vitesse réactionnelle initiale pour différentes concentrations en lysozyme.Est d’autant plus grand que l’affinité pour le substrat est élevée.Vaut la moitié de Vmax du lysozyme. 6 La méthode de Bradford : Permet de mesurer la quantité de lysozyme présente dans vos échantillonsPermet de doser les protéines présentes dans vos échantillons.Nécessite un colorant qui se lie spécifiquement aux protéines.Est une méthode quantitative, non spécifique.Nécessite des solutions de protéines dont la concentration est connue 7 D’après les résultats obtenus lors du dosage de Bradford, on peut en déduire que : E3 comporte plus de protéines que E1.E3 est la fraction la plus riche en lysozymeLa pente de la droite-étalon vaut 500.L’ordonnée à l’origine de la droite-étalon vaut 0,500.Le filtrat contient 125 µg de protéines par millilitre. 8 Le SDS-PAGE : Permet d’évaluer approximativement la pureté d’un échantillonPermet de séparer les protéines d’un échantillon en fonction de leur taille.Permet d’évaluer la taille des protéines présentes dans un échantillon.Est suivie d’une coloration à l’argent pour visualiser les protéines.La migration des protéines dans le gel est influencée par leur charge intrinsèque 9 D’après les résultats obtenus pour l’électrophorèse sur gel (SDS-PAGE) ci-dessous : La fraction E4 comporte plus de lysozyme que E2, mais elle est moins pure.Le lysozyme s’est bien fixé à la résine.Le lysozyme est chargé positivement, c’est pourquoi il migre rapidement dans le gel.Le lysozyme est de petite taille c’est pourquoi il migre rapidement dans le gel.L’activité enzymatique de la fraction E1 est probablement nulle 10 D’après les résultats indiqués dans le tableau ci-dessous, on peut conclure que : Le rendement d’extraction pour la fraction E5 est de 40%.Vous avez perdu 20% du lysozyme initial, durant les lavagesLa fraction E2 contient moins de lysozyme que E5.La fraction E2 est moins pure (en lysozyme) que E5.Le facteur de purification pour la fraction E5 vaut 10. Une erreur dans ce Quiz ? Contactez l'auteur Commentaires
